基因工程人抗角蛋白抗体的免疫学纯化与鉴定

摘要

在成功克隆和表达了人源性抗角蛋白抗体之后，利用金属螯合亲和层析法进行提取纯化，并用Western blot、竞争抑制性ELISA和非竞争性酶免疫亲和力测定技术对该抗体的特异性、识别抗原组分以及亲和力等免疫学特性进行鉴定。结果发现，金属螯合亲和层析技术能够有效地将抗角蛋白可溶性Fab从表达上清中纯化出来。所制备抗体特异性良好，能够识别相对分子量45 000～48 000角蛋白，并具有较高的亲和力，亲和系数为3.5×109M－1。这种高特异性、高亲和力的人源性抗角蛋白抗体将在抗角蛋白自身抗体的功能与意义研究以及今后临床应用前景的探讨中发挥重要作用。