吸水链霉菌井冈变种JG5008转化系统的初建

摘要

吸水链霉菌井冈变种JG5 0 0 8的最佳转化条件是 :JG5 0 0 8在添加MgCl2 (cf=0 .0 0 5mol/L)和甘氨酸 (ρf=0 .5g/L)的含 10 %蔗糖的YEME培养基中接种浓度n≈ 10 8mL-1的JG5 0 0 8孢子悬液 ,37℃摇床培养 12h ,收获菌丝体 .在 32℃、溶菌酶浓度 ρ =2mg/mL的条件下溶菌 1h后制备原生质体 ,用T缓冲液在R2 YE培养基上进行转化 .本文初步建立了JG5 0 0 8的质粒载体系统 ,包括不同来源的pIJ70 2、pIJ92 2、pCZA16 8、pHZ132等质粒载体 .感染实验证实 ,JG5 0 0 8对外源DNA具有较强的限制性 .图 1表 5参