HSP70L1与OVA融合蛋白的制备及其生物学功能的初步研究

摘要

目的：获取原核表达的新型热休克蛋白分子HSP70L1与模型抗原卵清蛋白(OVA)片段的融合蛋白,并观察其生物学功能。方法：构建表达载体pQE30-OVA-HSP70L1,在相应的表达宿主菌中诱导表达后,从包涵体中依次以Ni^(2+)螯合层析柱和DEAE层析柱纯化目的蛋白；通过获得的融合蛋白对树突状细胞的成熟和细胞因子释放的促进作用初步检测其生物学活性。结果：pQE30-OVA-HSP70L1载体构建正确；纯化的OVA-HSP70L1融合蛋白相对分子质量约68 000,纯度大于95%；活性研究表明,OVA-HSP70L1融合蛋白可以有效地促进树突状细胞的成熟和Th1型细胞因子IL-12和TNF-α的产生。结论：纯化的HSPTOL1与抗原OVA融合蛋白具有一定的生物学功能,融合蛋白的获取为进一步开展HSP70L1佐剂效应机制研究奠定了基础。