肝星状细胞合成气体信号分子H2S的测定及其意义

摘要

目的:测定活化肝星状细胞(hepaticstellatecells,HSC)H2S的生成率及对细胞增殖的影响.方法:采用活化大鼠HSC-T6,分4组:对照组、炔丙基甘氨酸(D-Propargylglycine,DL-PPG)组、N-硝基-L-精氨酸甲酯(Nitro-L-argininemethylester,L-NAME)组、氯化高铁血红素(hemin)组,每组重复6个皿.RT-PCR检测HSC-T6胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)mRNA水平,亚甲基蓝分光光度法测定H2S生成率,MTT法观察不同浓度外源性H2S供体-NaSH(0,50,100,500,1000μmol/L)对HSC-T6增殖的影响.结果:HSC-T6能自分泌H2S,DL-PPG可明显减少HSC-T6H2S生成率(4.55nmol/min±1.06nmol/minvs6.79nmol/min±1.27nmol/min,P<0.05).RT-PCR显示:HSC-T6CSEmRNA阳性,DL-PPG、hemin均降低HSC-T6CSEmRNA水平(P<0.05);L-NAME对HSC-T6CSEmRNA无明显影响.50μmol/LNaSH可明显促进HSC-T6增殖(细胞存活率为116%),500-1000μmol/LNaSH对细胞增殖无明显影响.结论:活化HSC自分泌H2S,并且影响其增殖.H2S在肝纤维化及肝硬化门脉高压症的发生机制可能有重要作用.