VEGF诱导人脐静脉内皮细胞体外三维成型和对EphrinB2/EphB4表达的影响

摘要

目的观察不同浓度血管内皮生长因子(vascularendothelial growthfactor,VEGF)对原代培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical veinendothelial cells,HUVECs)体外“小管样结构”(tubule-likestructures,TLS)形成能力、表达EphrinB及其受体EphB4的影响。方法采用酶消化法分离、纯化人脐静脉内皮细胞并经形态学和免疫细胞化学鉴定。以不同浓度(0.1～50ng/ml)的VEGF体外处理传代HUVECs,观测时相点设为刺激后24、48、72、96h;采用Matrigel三维培养系统和免疫细胞化学染色方法分别观测VEGF处理后HUVECs体外血管形成能力以及EphrinB2/EphB4表达的变化,并对后者进行定量分析。结果HUVECs有EphB4表达,但未检测到EphrinB2表达;不同浓度的VEGF刺激HUVECs在各观测时间点未见EphB4表达的显著性差异,亦未诱导出EphrinB2表达。VEGF能够诱导HUVECs在Matrigel形成小管样结构,并呈剂量依赖性。结论VEGF能以剂量依赖方式诱导HUVECs在Matrigel形成TLS,但不能诱导HUVECs表达EphrinB2或EphB4。