少突胶质祖细胞移植对新生鼠缺氧缺血脑损伤学习记忆功能的影响

摘要

目的探讨原代少突胶质祖细胞(O2A)的培养方法,并移植入缺氧缺血新生鼠脑内,为细胞干预早产儿白质软化病的研究提供细胞学基础。方法根据O2A的生长时间、生长方式及细胞对培养层粘附等特性的差异,采用两次恒温摇床振荡分离纯化法和条件限定培养基培养,获得高纯度的O2A,经脑室移植入缺氧缺血性脑白质损伤的新生鼠脑内。结果体外培养24h后,细胞成堆聚集形成克隆球;第2～3天,细胞呈圆形或椭圆形,多数具有双极突起。实验新生鼠由脑室移植O2A后,测定平均逃避潜伏期:PVL+O2A移植组为(7.33±1.41)s,PVL+PBS组为(16.24±1.63)s,PVL组为(11.75±1.50)s;PVL+O2A移植组的平均逃避潜伏期比PVL+PBS组和PVL组缩短,与PVL+PBS组、PVL组比较差异均有统计学意义(P<0.001)。结论两次恒温摇床振荡分离纯化法和条件限定培养基培养可获取高纯度的O2A;平均逃避潜伏期测定提示,移植O2A在脑内可分化为成熟的少突胶质细胞,使轴突重新髓鞘化,促进脑功能的修复。