p15^(INK4B)和p21^(WAF1)基因对人胰腺癌细胞系BxPC3的协同抑制作用

摘要

目的探讨p15INK4B(p15)和p21WAF1(p21)基因联合转染对人胰腺癌细胞系BxPC3细胞增殖和凋亡的影响。方法脂质体介导将pcDNA3.1(+)-p15和pcDNA3.1(+)-p21转染BxPC3细胞,稳定筛选后用RT-PCR检测转染细胞p15和p21基因mRNA表达,Western blot检测转染细胞p15和p21蛋白的表达。用MTT法和透射电镜检测p15和p21基因分别及联合转染对BxPC3细胞增殖和凋亡的影响,流式细胞仪检测BxPC3细胞周期分布和凋亡率。结果 p15和p21转染组BxPC3细胞生长速度低于空载体组和未转染组,联合转染与二者单独转染相比,细胞体外生长速度受抑制更明显。p15和p21转染组BxPC3细胞发生G1/S阻滞,G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组,S期比例显著低于空载体组和未转染组,并出现凋亡峰,透射电镜亦发现p15和p21转染组发生细胞凋亡。p15和p21联合转染组与二者单独转染相比,发生更为明显G1/S阻滞,G1期比例升高,有统计学意义,S期比例降低,但无统计学意义,凋亡率升高,有统计学意义。透射电镜发现联合转染组诱导BxPC3发生更明显的细胞凋亡。结论 p15和p21基因联合转染可以进一步增强对人胰腺癌BxPC3细胞的抑制作用和诱导凋亡作用。