肠上皮细胞来源整合素αVβ6对树突状细胞功能的影响

摘要

目的:研究肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IEC)来源的整合素αVβ6对骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs)功能的影响.方法:分离、培养小鼠IEC和DC,IEC经卵清蛋白(ovalbumin,OVA)刺激后,多步离心法制备外泌体(exosome).应用免疫胶体金对外泌体中的整合素αVβ6进行定性,通过免疫磁珠技术,分离获取DC,流式细胞仪检测分离后DC纯度.然后将分离后的DC分5组,分别为空白组、OVA组、外泌体组、外泌体+抗整合素αVβ6抗体组、外泌体+羊抗小鼠IgG组,观察各组对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的反应.ELISA法检测DC在LPS刺激前后IL-12p70的表达.LPS刺激前活性转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)以及总TGF-β1的表达.结果:OVA组与空白组相比,总TGF-β1表达明显增高(226.636±40.355vs176.947±23.072,P0.05).空白组与外泌体+抗整合素αVβ6抗体组相比,活化TGF-β1表达无明显变化(P>0.05),但总TGF-β1表达明显增高(P0.05).结论:IEC来源整合素αVβ6能增加DC活性,以及TGF-β1和总TGF-β1的表达量,并拮抗LPS对BMDC的促成熟作用.