树突状细胞在大鼠再生肝中分布及数量变化

摘要

探讨树突状细胞在大鼠再生肝中分布及数量变化,为深入研究其在肝再生进程中的作用奠定基础。制作大鼠2/3肝切除模型(PH),用两步灌流法分散肝脏细胞,用Percoll密度梯度离心和ox62免疫磁珠分离相结合方法分离树突状细胞(DC),用免疫组织化学方法定性、定位CD86和CD103在再生肝(RL)、分散的肝脏细胞及分离的树突状细胞中分布,用蛋白免疫印迹方法定量树突状细胞的CD86和CD103,用RT-PCR定量分离的树突状细胞CD86和CD103的mRNA。结果表明,0h再生肝树突状细胞分布于肝血窦、中央静脉、胆管周围,12h在远离中央静脉和胆管的部位出现,24h呈弥散状分布,168h分布与对照相同;从肝切除后0、2、6、12、24、30、36、72、120、168h等10个时间点的大鼠再生肝中收获的树突状细胞平均数分别为每只大鼠1.55、1.59、1.87、2.46、1.49、2.73、3.87、6.04、6.52、8.40百万个,CD86和CD103阳性细胞数目、细胞活性均在95%以上。上述结果说明在肝再生进程中树突状细胞的分布由肝血窦、中央静脉、胆管周围逐渐向全肝弥散,24h弥散达到高峰,之后回落,至168h分布与对照相同,但其数量随肝再生进程而增加。