适合AFLP分析用的节瓜基因组DNA提取方法的研究

摘要

本研究以CTAB法为基础，采用以下5种处理提取节瓜叶片基因组DNA：A、PVPP（3％）＋抗坏血酸（100mmol／L）；B、β-巯基乙醇（3％）＋抗坏血酸（100mmol／L）；C、PVPP（3％）＋半胱氨酸（5％）；D、PVPP（3％）＋β-巯基乙醇（3％）；E、抗坏血酸（100mmol/L）＋半胱氨酸（5％）。实验结果表明：在5种处理中，C处理提取的DNA质量最高，其溶液呈无色透明状，经核酸蛋白仪测定其OD260/280为1．8～2．0；经0.8％琼脂糖凝胶电泳检测，节瓜叶片基因组DNA带型清晰、完整、无降解，蛋白、多糖、酚类及RNA等去除比较彻底；经AFLP分析，酶切彻底，PCR扩增后的带型清晰稳定，重复性好，说明C处理提取的节瓜基因组DNA完全满足AFLP分析的要求。