条锈菌诱导下的小麦叶片总RNA提取方法的比较及LD-PCR扩增

摘要

为寻找一种既能提取到高质量高产量小麦RNA、又能提取到高质量条锈菌RNA的方法,利用Trizol法、Licl法、SDS法和Bizol法分别从条锈菌诱导的小麦叶片中提取了总RNA,并对Trizol法和Bizol法提取的RNA进行了长距离PCR（LD-PCR）扩增。结果表明,Trizol法、Licl法、SDS法和Bizol法提取的RNA产量（μg/100mg鲜重叶片）分别为4.72、1.15、1.56、10.43μg/100 mg,Trizol法和Bizol法提取的RNA产量明显高于Licl法和SDS法。Trizol法提取的RNA合成的cDNA片段大小主要集中在0.25-2.0 kb范围内,而Bizol法提取的RNA合成的cDNA片段大小主要集中在0.5-5.0 kb范围内,Bizol法提取的RNA反转录合成的cDNA质量好于Trizol法。Bizol法同样能提取到高质量的条锈菌RNA,而且提取RNA的成本较低。综合各种因素,Bizol法是条锈菌诱导下的小麦叶片总RNA提取的较理想方法。