异丙酚在不同pH值环境下对苯甲酰苯甲酸ATP诱发的巨噬细胞嘌呤2X7受体电流的影响

摘要

目的:观察在不同pH值条件下巨噬细胞膜嘌呤2X7(P2X7)受体电流对其特异性激动剂苯甲酰苯甲酸ATP(BZATP)的敏感性及异丙酚对P2X7受体电流的影响。方法:应用培养的RAW264.7巨噬细胞,采用全细胞膜片钳技术,向细胞施加BZATP(10～10000μmol/L)5s,记录电流,计算细胞外液pH值为7.4或6.0时BZATP的半效浓度(EC50)。观察异丙酚对P2X7受体电流的影响时,在细胞外液pH值为6.5或7.4时,向细胞预先施加异丙酚(1、3、10、30、100μmol/L)1min,再施加2倍EC50水平的BZATP持续5s,计算异丙酚影响P2X7受体电流的半效抑制浓度(IC50)。观察异丙酚在不同pH值环境下对BZATP的浓度效应曲线的影响时,先施加IC50水平的异丙酚1min,再施加不同浓度的BZATP并持续5s,计算BZATP的EC50。结果:BZATP在细胞外液pH值为7.4或6.0时诱发P2X7受体电流的EC50分别为(112±26)μmol/L或(643±87)μmol/L。细胞外液pH值为7.4时,异丙酚可浓度依赖性地抑制P2X7受体电流,其IC50为(31±6)μmol/L,且此水平异丙酚可使BZATP的浓度效应曲线右移。细胞外液pH值为6.0时,异丙酚可浓度依赖性地增强P2X7受体电流,其EC50为(38±6)μmol/L,此浓度异丙酚使BZATP的浓度效应曲线发生左移。结论:细胞外液pH值降低使P2X7受体对BZATP的敏感性下降,临床相关浓度的异丙酚在细胞外液pH值为7.4时对P2X7受体电流表现为剂量依赖性的抑制作用,但pH值为6.0时则呈现增强作用。