信号肽重组hβD2在A549细胞中表达纯化及抗菌活性测定

摘要

目的　通过构建在A5 49细胞中高表达人防卫素hβD2的表达体系 ,获得人源化hβD2。 方法　构建pLNCX2 CEA信号肽 hβD2成熟肽逆转录病毒表达载体 ,经逆转录包装细胞PT67包装后获得含融合基因的侵袭性病毒 ,该病毒感染宿主细胞A5 49后将融合基因整合入宿主基因组中 ,收集培养基上清 ,分离纯化获得目的蛋白hβD2 ,测定目的蛋白的抗菌活性。结果　收集转染有融合基因的A5 49细胞培养基上清 ,经WesternBlot和质谱仪分析 ,纯化后的目的蛋白为hβD2 ,具有较强的抗菌活性。结论　将CEA信号肽重组hβD2基因转染A5 49细胞后 ,细胞具有表达分泌型hβD2的功能。