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凝血酶体外诱导模拟脑室出血后大鼠蛛网膜细胞纤维化的实验研究

         

摘要

目的观察凝血酶(thrombin)刺激体外培养大鼠蛛网膜细胞后纤维化程度的变化,探讨其与脑室出血(intraventricular hemorrhage,IVH)后大鼠慢性脑积水形成的关系.方法采用SD大鼠蛛网膜细胞,经不同浓度凝血酶刺激,在体外模拟脑室出血(IVH)后慢性脑积水大鼠的蛛网膜细胞纤维化的病理生理过程.细胞免疫化学法(immunocytochemistry,ICC)鉴定传代培养的SD大鼠蛛网膜细胞标志物细胞角蛋白(CK 8/18)和桥粒蛋白(Desmoplakin)的表达.qRT-PCR与Western Blot检测细胞纤维化因子(Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、TGF-β1、α-SMA)的表达,观察其纤维化程度,同时检测比较各组细胞的表达差异.结果(1)培养的蛛网膜细胞标志物Cytokeratin和Desmoplakin表达阳性.(2)凝血酶可诱导蛛网膜细胞纤维化,在50u/ml浓度下,蛛网膜细胞纤维化程度最明显.(3)实验组较对照组细胞纤维化程度明显.结论体外可以稳定培养大鼠蛛网膜细胞.凝血酶诱导的蛛网膜细胞各种纤维化指标明显高于正常组,提示纤维化模型构建成功.构建成功的纤维化蛛网膜细胞有利于下一步深入研究脑室出血后慢性脑积水的机制.

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