梅毒螺旋体TpN17抗原全长表达纯化和ELISA检测

摘要

目的在大肠埃希菌中重组表达梅毒密螺旋体TpN17抗原,用其建立梅毒诊断血清学方法。方法酶切与PCR联用,合成全长TpN17基因,亚克隆后克隆到pET-HIS质粒并转化到大肠杆菌BL21株中表达。亲和层析纯化。用纯化的rTpN17包被微孔板,ELISA方法检测临床8份梅毒阳性血清和4份梅毒阴性血清。结果获得了重组表达并纯化的TpN17,ELISA检测结果表明重组蛋白能被梅毒患者阳性血清所识别,特异性100%,灵敏度100%。结论该重组蛋白具有良好的免疫反应性,能鉴别梅毒阳性血清,有望进一步应用于梅毒感染的血清学检测。