同时检测SEN病毒D和H聚合酶链反应法的建立

摘要

目的　建立同时检测SEN病毒D和H(SENV -D和H)巢式聚合酶链反应法 (nPCR)。方法　第一轮PCR外引物为SENV -D和H开放读码框架 (ORF) 1区的共同序列 ,第二轮PCR内引物分别为SENV -D和HORF1区型特异性引物。应用双脱氧链末端终止法对SENV -D和H的PCR产物进行克隆测序。结果　应用同时检测SENV -D和H的nPCR法最终检出SENV -D和H的血清稀释度为 10 3。序列分析表明 ,用本法检出的SENV -D(DTd株 )和SENV-H(DTh株 )与GenBank收录的SENV -D和H株核苷酸序列同源性均为 92 %。检测 173例慢性乙型肝炎 (轻、中度 )患者 ,SENV -D和H的总感染率为 5 8 4%。结论　本法可用于SENV