大鼠肝胞液糖皮质激素受体的高效液相分析

摘要

目的 :应用高效液相疏水作用层析法 (HPHIC)分离并纯化大鼠肝胞液高、低亲和力糖皮质激素受体 (GRH 和 GRL) ,为临床大剂量糖皮质激素 (GC)冲击治疗提供实验依据。方法 :超速离心大鼠肝组织 ,取上清 ,核素 3 H-地塞米松 (Dex)标记后 ,分别行 Pseudoscatchard分析及 HPHIC分析 ,SDS- PAGE及 Western印迹法鉴定 HPHIC分析后所收集的峰值管蛋白的性质。 结果 :在标准大气压 ,0～ 4℃条件下 ,只出现一个洗脱峰 ,峰值位置在 9～ 11min。而在标准大气压 ,2 5℃且 3 H- Dex≥ 5 0nmol/ L时出现两个洗脱峰 ,峰值位置在 3～ 7min及 9～ 11min。 SDS- PAGE及 Western印迹法显示 5～ 7min和 9～ 11min时出现相对分子质量约 6 0 0 0 0、可与 GC单克隆抗体结合的蛋白质分子。结论 :提示有两种不同大小的 GR分子存在 ,但是否存在 GRH和 GRL