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流式细胞仪在小鼠造血干细胞基因转移效率测定中的应用

     

摘要

目的探讨流式细胞仪在造血干细胞基因转移效率测定中的应用价值。方法以干细胞因子(SCF)、白细胞介素(IL)3、IL6单独或联合作用(SCF/IL3、SCF/IL6、IL3/IL6、SCF/IL3/IL6)后的Balb/c小鼠造血干细胞作为靶细胞,应用含有绿色荧光蛋白(GFP)基因的逆转录病毒载体GCGPXSN介导的基因转移技术实施基因转移,采用FACS型流式细胞仪测定基因转移效率。结果病毒上清转染的阳性对照组基因转移率为0.06%,以不同细胞因子作用后基因转移效率提高至007%~0.20%,细胞因子作用前后比较,除SCF/IL6组外,差异均有显著或非常显著意义(P<005或P<001)。其中以SCF/IL3组与SCF/IL3/IL6组的提高最为明显,均达020%,与其他各细胞因子组比较,差异也有非常显著意义(P<001)。结论应用流式细胞仪可测定出SCF、IL3、IL6单独或联合作用对小鼠造血干细胞基因转移效率的不同影响,具有快速、方便、准确的优点。

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