川牛膝、麻牛膝及杂交牛膝多糖的分离、纯化和对猪小肠上皮细胞活性的比较研究

摘要

研究旨在比较川牛膝及其常见伪品的多糖含量、组分和对猪小肠上皮细胞活性的差异。用乙醇除杂,水加热回流法得粗多糖;用阴离子交换层析法和凝胶柱层析法分离、纯化多糖,并测定多糖的相对分子量;用CCK-8试剂盒系统测定多糖对猪小肠上皮细胞活性的影响;用荧光定量PCR检测多糖作用后炎症细胞因子IL-6表达情况。试验结果:①川牛膝粗多糖得率为7.40%;麻牛膝粗多糖得率为1.67%;杂交牛膝粗多糖得率为0.38%;②川牛膝酸性多糖得率为94.40%,中性多糖得率为1.10%;麻牛膝酸性多糖得率为30.74%,中性多糖得率为23.00%;杂交牛膝酸性多糖得率为11.20%,中性多糖得率为10.00%;③川牛膝多糖相对分子量主要分布在7 500 Da左右、200 000～400 000 Da和1 200 000～1 700 000 Da;麻牛膝多糖的相对分子量主要集中在7 500 Da左右;杂交牛膝多糖相对分子量主要集中在6 000 Da左右;④川牛膝多糖和麻牛膝多糖的低剂量和高剂量组对猪小肠上皮细胞活性均无明显影响;川牛膝多糖和麻牛膝多糖均能显著抑制炎症细胞因子IL-6的表达。川牛膝多糖含量显著高于麻牛膝和杂交牛膝多糖,川牛膝和麻牛膝多糖对猪小肠上皮细胞活性无明显影响,但均能降低炎症细胞因子IL-6的表达量。