HCN2转染MSCs异体移植治疗完全性房室传导阻滞的实验研究

摘要

目的构建HCN2重组载体并转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)以构建起搏细胞,将起搏细胞移植至完全性房室传导阻滞动物模型的左束支,从而改善心脏的传导功能。方法体外分离并培养大鼠骨髓间充质干细胞,将体外构建的HCN2重组载体用罗氏非脂质体转染试剂转染到骨髓间充质干细胞内。采用射频消融的方法制犬的完全性房室传导阻滞模型,同时置入临时起搏器,调节起搏心率60次/分予以保护。将体外构建起搏细胞原位植入动物模型。起搏细胞移植成功后28天将动物处死,进行组织学研究。结果体外分离培养的MSCs在含10%胎牛血清的DMEM培养基中生长良好,能够满足细胞转染及转染后细胞移植的需求。MSCs转染质粒后20 h荧光显微镜下观察,可见绿色荧光蛋白的表达,测定转染效率约为30%。组织学研究显示,干细胞可以在宿主体内存活,并表达缝隙连接蛋白CX43、CX45。结论 MSCs转染HCN2后可以有效表达HCN2通道蛋白,MSCs重组细胞心脏移植后能够存活并表达缝隙连接蛋白CX43、CX45。