白念珠菌钙调蛋白基因单点突变重组质粒的构建和鉴定

摘要

目的 :构建白念珠菌钙调蛋白基因 (CMD1)单点突变重组质粒 ,为进一步探讨 CMD1突变对真菌生长周期及致病性的影响奠定基础。方法 :采用 PCR定点突变法 ,将 CMD1编码 C端 3个苯丙氨酸 (F89、F92和 F141)的碱基分别定点突变成编码丙氨酸的碱基 ,构建 CMD1单点突变重组表达质粒 ,并进行序列测定。结果 :测序结果证实 ,所构建的 3个重组质粒均含有相应的 CMD1定点突变后的序列 ,F89+:TTC→ GCT;F92 +:TTT→ GCC;F141+:TTT→ GCC。 结论 :成功构建了 3个CMD1单点突变重组表达质粒 ,为后续研究奠定了基础。