hTRT反义基因对胃癌细胞端粒酶及凋亡相关基因表达的影响

摘要

目的:探讨人端粒酶蛋白催化活性亚单位(humantelomerasereversetranscriptase,hTRT)反义基因治疗对胃癌细胞端粒酶及凋亡相关基因表达的影响.方法:采用基因重组的方法,构建hTRT正?反义真核表达载体,并用脂质体导入SGC-7901胃癌细胞株,检测转染细胞增殖能力?细胞周期?端粒酶活性?端粒酶亚单位及bcl-2,c-myc基因表达的变化.结果:成功构建hTRT正?反义真核表达载体,并导入胃癌细胞,筛选出稳定表达正?反义hTRT的阳性克隆7901-S,7901-AS1和7901-AS2.反义细胞增生能力明显减弱,凋亡细胞和G0/G1期细胞增多,增生指数下降,端粒酶活性下降,端粒酶亚单位hTRT的表达减少,而TP1,hTR无明显变化,进一步研究发现bcl-2和c-myc基因的表达在转录和翻译水平均明显下调.结论:hTRT和c-myc,bcl-2基因的调节作用是相互的,反义hTRT基因可以通过下调胃癌细胞hTRT?c-myc?bcl-2基因的表达,一方面降低端粒酶活性,另一方面一定程度增加凋亡细胞的比率,从而抑制细胞的生长.