小鼠空肠Cajal间质细胞的分离、培养和亚甲蓝活染选择性标记

摘要

目的:探讨组织解剖剥离小鼠空肠起博细胞的培养和亚甲蓝选择性标记鉴定方法,为区分Cajal间质细胞亚型及其功能研究提供条件.方法:取CD1新生小鼠的空肠组织,采用精细快速剥离,取含有肌间丛及肌间丛Cajal间质细胞的纵行肌组织块进行培养.新生发的细胞在成活状态下用亚甲蓝和c-kit特异性抗体标记,证实细胞类型.结果:剥离组织所含Cajal间质细胞主要为肌间丛cajal间质细胞(ICC-AP),即起博细胞,并具有其固有特征,着色亚甲蓝细胞被c-kit抗体荧光染色证实为Caial间质细胞,而神经细胞、平滑肌细胞及其他亚型Cajal间质细胞在成活状态下均不被亚甲蓝着色.结论:组织解剖剥离能选择性获取空肠肌间丛起博细胞,活染亚甲蓝标记能特异性区分出肌间丛起博细胞并可用于进一步的功能研究.