脑源性神经营养因子-B型酪氨酸激酶受体-钾氯共转运体2信号通路在大鼠糖尿病周围神经痛机制中的作用

摘要

目的观察鞘内注射B型酪氨酸激酶受体(TrkB)抑制剂K252a对糖尿病大鼠机械性痛阈、脊髓背角脑源性神经营养因子(BDNF)、钾氯共转运体2(KCC2)表达的影响,以了解BDNF-TrkB-KCC2信号通路在糖尿病神经痛机制中的作用。方法第一部分:22只Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠,10只分别于链脲霉素(STZ)注射前及注射后1、2、4周检测其机械性痛阈;上述时间点各取3只大鼠腰膨大处脊髓背角组织,采用Western印迹法检测BDNF、KCC2的表达。第二部分:取40只SD雄性大鼠,随机分为正常对照组、STZ+0.9%氯化钠溶液组、STZ+K252a组、STZ+K252a溶剂组,每组10只。STZ注射4周后,STZ3组分别予鞘内注射0.9%氯化钠溶液10μL、K252a10μg/10μL、K252a的溶剂(0.01%二甲亚砜)10μL,每天1次,连续4d。分别于给药前30min及末次给药后30min,检测大鼠的机械性痛阈值。行为学检测结束后,采用Western印迹法检测各组大鼠腰膨大脊髓背角BDNF、KCC2的表达。结果第一部分:STZ注射后2周,大鼠的机械性痛阈值较注射前及注射后1周显著降低(P值均0.05),STZ+0.9%氯化钠溶液组及STZ+K252a溶剂组与给药前的差异均无统计学意义(P值均>0.05);STZ+K252a组BDNF表达水平较STZ+0.9%氯化钠溶液组及STZ+K252a溶剂组显著降低(P值均0.05);STZ+K252a组KCC2表达水平较STZ+0.9%氯化钠溶液组及STZ+K252a溶剂组显著升高(P值均0.05)。结论连续鞘内注射K252a后,糖尿病神经痛大鼠机械性痛阈值及脊髓背角BDNF、KCC2表达水平均可恢复正常,BDNF-TrkB信号通路可能通过调节其下游KCC2蛋白的表达参与糖尿病神经痛的形成。