小麦类甜蛋白基因 (TaTLP1)的克隆、定位和蛋白表达(英文)

摘要

为深入研究小麦 (TriticumaestivumL .)的抗白粉病机制 ,应用反转录PCR(Reverse -TranscriptionPolymeraseChainReaction ,RT -PCR)和cDNA文库筛选技术 ,从抗白粉病小麦 -簇毛麦 6VS/6AL易位系 (wheat-Haynaldiavillosa6VS/6ALtranslocationline)中分离到一个小麦类甜蛋白基因的全长cDNA。该基因编码由 173个氨基酸残基组成的酸性多肽。经蛋白质一级结构推导分析 ,它与植物中已分离的类甜蛋白高度同源 ,将其命名为TaTLP1基因 (Gen Bank登录号 :AF3 84146)。Northern分析发现 ,该基因在抗病的小麦 -簇毛麦 6VS/6AL易位系及感病的“扬麦 5号”中的表达水平有明显差异。Western分析表明 ,在小麦叶片中TaTLP1的表达产物是分子量约为 160 0 0道尔顿 (16kDa)的可溶性细胞质蛋白 ,并受白粉菌 (Erysiphgraminis)诱导表达。研究发现 ,TaTLP1的表达量在抗病的 6VS/6AL易位系中比在感病的“扬麦 5号”中明显高。从蛋白质水平上证实该类甜蛋白可能与小麦 6VS/6AL易位系的抗白粉病性相关。Southern分析显示 ,TaTLP1基因在小麦基因组中有 1～ 2个拷贝。利用中国春缺体 /四体系分析 ,已将TaTLP1基因定位在小麦 7B和