非梗阻性无精症患者尿源干细胞分离培养与鉴定

摘要

目的探索非梗阻性无精症(NOA)患者尿液中尿源干细胞(USCs)的分离培养与鉴定技术。方法收集北部战区总医院2018—2019年收治的3例NOA成年男性患者的尿液。通过离心提取、贴壁培养等方法扩增USCs,观察细胞形态;通过CCK-8实验、流式细胞术、免疫荧光技术等检测USCs的增殖能力、细胞周期、表面标志物表达情况及其向骨、软骨及脂肪细胞分化的能力。结果NOA患者USCs具有米粒样外观,呈对数生长;造血干细胞系表面标志物(CD31、CD34、CD45)表达呈阴性,间充质干细胞系表面标志物(CD44、CD133)、胚胎干细胞表面标志物(SSEA4)、肾周细胞表面标志物(CD146、PDGFRB、NG2)表达呈阳性;经骨、软骨及脂肪细胞定向诱导培养基诱导培养后,分别表达骨、软骨及脂肪细胞表面标志物hOsteocalcin、hAggrecan、mFABP4。结论本研究成功获得NOA患者USCs分离培养与鉴定的方法,为进一步探索USCs治疗NOA患者提供了实验基础。