潘生丁抑制平衡型核苷转运蛋白对5氟尿嘧啶在胰腺癌细胞内浓聚的影响

摘要

目的 :研究阻断平衡型核苷转运蛋白 (ENTs)后对胰腺癌细胞膜转运 5氟尿嘧啶 (5 FU)能力的影响。方法 :培养的PANC 1细胞分为ENTs阻断组和ENTs非阻断组 ,阻断组用潘生丁将ENTs阻断 ,非阻断组则未用潘生丁。两组培养基中均加入 5 FU 10 0 μg/ml。温育 15,3 0min ,1,2 ,4h后细胞用橡皮刮取收集。取等量细胞刮取液 2份各 10 0 μl ,一份用毛细管区带电泳测定细胞内 5 FU总量、另一份用作平行样本测定总蛋白含量。根据平行样本细胞总蛋白来确定细胞数 ,再依细胞体积计算单细胞内药物浓度。结果 :ENTs非阻断组细胞内 5 FU浓度在 15min内上升较快 ,达 66 99± 10 16pg/nl,为培养基中 5 FU浓度的 67% ,3 0min为 83 75± 5 3 3 3pg/nl,1h达高峰 (92 86± 1 60 4pg/nl) ,为培养基中 5 FU浓度的 93 % ,以后处于平台。ENTs阻断组细胞内 5 FU浓度上升较慢 ,15min仅为ENTs非阻断组浓度的 68 65% ;3 0min为ENTs非阻断组浓度的 70 66% ;1h达ENTs非阻断组的最高浓度 ;但此后ENTs阻断组细胞内 5 FU浓度仍继续升高 ,2h达 13 8 3± 9 769pg/nl,为ENTs非阻断组的1 64倍 (P <0 0 1)。结果提示 ,完全阻断ENTs后早期细胞内 5 FU浓度上升较慢 ,但随着细胞在 5 FU内暴露时间延长 ,5 FU在细胞内浓聚作用明显。结论 :阻断胰腺?