大麦黄花叶病毒(BaYMV)的提纯

摘要

本文提出了一个改进了的大麦黄花叶病毒提纯方法。病大麦叶片在高浓度(0.5M)磷酸钾缓冲液pH7.0(内含0.1%ME,0.01M EDTA)中匀浆,经1/4体积四氯化碳澄清后,病汁液用6%PEG,3%NaCl和1%TritonX-100混合物沉淀,高浓度(0.5M)同种缓冲液(含0.5M尿素,0.1%ME和0.01M EDTA)悬浮,接着进行20%蔗糖垫(含0.3%Triton X-100)超迷离心去除寄主细胞成分,10—40%蔗糖密度梯度离心进一步纯化。所获得的BaYMv提纯制剂A260/A280,A260/A240比值分别为1.20和1.04,纯病毒产量约为5.5—8.0mg/kg病叶。提纯病毒制剂在电镜下看不到有寄主杂质存在。