XCT790对缺氧、无血清及高糖诱导骨髓间充质干细胞凋亡的影响

摘要

目的:观察雌激素相关受体α(estrogen-related receptorα,ERRα)的特异性反向激动剂XCT790对无血清、缺氧及高糖诱导的C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:MSCs分为正常培养对照组(正常条件下培养)和0、5、10、20μmol/L XCT790干预组(在3%O2、无血清、25 mmol/L葡萄糖浓度条件下培养),以流式细胞仪Annexin V/7-AAD双染法检测各组在缺氧、缺营养、高葡萄糖条件下的凋亡率;Western blot检测B淋巴细胞瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bax蛋白表达水平,并计算其比值。结果:缺氧、无血清及高糖诱导24 h后,5μmol/L XCT790干预组(20.02±0.92)%、10μmol/L XCT790干预组(26.04±1.24)%、20μmol/L XCT790干预组(50.73±3.55)%的凋亡率明显高于0μmol/L XCT790干预组(14.34±0.61)%,呈剂量依赖性(P<0.05)。Western blot显示,前凋亡蛋白Bax的表达5μmol/L XCT790干预组(0.132 3±0.033 8)、10μmol/L XCT790干预组(0.140 8±0.006 8)、20μmol/L XCT790干预组(0.199 4±0.061 7)较0μmol/L XCT790组(0.116 4±0.017 2)明显升高,而凋亡蛋白Bcl-2表达5μmol/L XCT790干预组(0.069 7±0.013 2)、10μmol/L XCT790干预组(0.051 2±0.005 6)、20μmol/L XCT790干预组(0.041 3±0.005 5)较0μmol/L XCT790组(0.092 3±0.021 3)明显降低(P<0.05)。Bcl-2/Bax比值5μmol/L XCT790干预组(0.530 7±0.027 9)、10μmol/L XCT790干预组(0.397 9±0.004 2)、20μmol/L XCT790干预组(0.234 8±0.032 1)较0μmol/L XCT790组(0.851 7±0.084 4)明显降低,呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:缺氧、无血清及高糖诱导下,拮抗ERRα可以使MSCs的凋亡率和Bcl-2/Bax比例明显降低,提示ERRα在细胞耐受凋亡过程中可能发挥重要保护作用。