先天性心脏病重度肺动脉高压血浆 microRNA 的分析与验证

摘要

目的应用microRNA芯片技术比较先天性心脏病(CHD)术后可逆性肺动脉高压(PAH)和不可逆性PAH(iPAH)患儿血浆中microRNA的表达谱,旨在发现能够区别PAH与iPAH的特异性的microRNA。方法选取2011年10月1日-2012年9月30日在上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心就诊的CHD相关性PAH患儿40例,治疗后6个月根据平均肺动脉压力(mPAP)将患儿分为3组:mPAP≥50mmHg(1mmHg=0.133kPa)为iPAH组(12例),mPAP 25～<50mmHg为可逆性PAH组(PAH组,15例),mPAP<25mmHg为对照组(13例)。取10例患儿(对照组3例,PAH组3例,iPAH组4例)的血浆标本进行microRNA芯片分析,取剩余30例患儿(对照组10例,PAH组12例,iPAH组8例)的血浆标本进行microRNA芯片结果的验证。结果 microRNA芯片分析结果显示,iPAH组表达上调的microRNA有7个,分别为microRNA-301a-3p、microRNA-145、microRNA-126、microRNA-26a、microRNA-374a、microRNA-1、microRNA-34a;表达下调的microRNA有3个,分别为microRNA-20b、microRNA-500a、microRNA-501-3p。选取表达差异最显著的5个microRNA(microRNA-301a-3p、microRNA-145、microRNA-126、microRNA-26a、microRNA-374a)进行实时荧光定量聚合酶链反应验证,结果与芯片结果基本相符合,iPAH组microRNA-145、microRNA-126的表达显著升高,分别为PAH组的3.00、2.66倍。结论通过microRNA芯片筛选和进一步的验证,iPAH患儿血浆中microRNA-145、microRNA-126表达显著升高,可以作为区分PAH与iPAH的血浆生物标志物。