HPLC法研究DNA及其甲基修饰物的酸性介质降解

摘要

用ＨＰＬＣ梯度洗脱法研究了ＤＮＡ在盐酸、高氨酸、三氯乙酸、三氟乙酸以及甲酸等酸性介质中的降解碱基的分离和确定。给出了ＭＮＵ与ＤＮＡ的加合产物的降解产率。对流动相组成、流率、柱温、梯度速率、ｐＨ值、盐浓度以及缓冲液浓度对容量因子（Ｋ＇）的影响分别进行了讨论。结果表明，ＤＮＡ在盐酸介质中可以得到最好的碱基回收率，ＭＮＵ与ＤＮＡ的加合产物在１ｍｏｌ／Ｌ盐酸介质中、２０ｍｉｎ条件下，可获得较好的碱基回收效果。