原位RT-PCR法定位检测柯萨奇B病毒RNA

摘要

目的　用定位检测细胞或组织中柯萨奇B病RNA的原位RT PCR方法 (直接法 )。方法　对柯萨奇B病毒 ( 1～ 6型 )感染HeLa细胞 ,经核酸酶 (DNase和RNase)处理后的病毒感染HeLa细胞以及非感染的HeLa细胞进行RT PCR和原位RT RCR检测。结果　经原位RT PCR扩增后 ,病毒感染的HeLa细胞呈蓝黑阳性信号 ;并且这种阳性信号经RNaseA作用而消失 ,却不受DNase作用的影响 ;而非感染的HeLa细胞则不着色 ,其显示的结果与RT PCR的结果一致。结论　原位RT PCR法可特异地检测柯萨奇B病毒感染HeLa细胞中的病毒RNA ,是一种特异和敏感的定位检测方法 ,可应用于研究该病毒的持续性感染及其与克山病等相关疾病的关系。