lncRNA RGMB-AS1通过靶向miR-129-5p调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的增殖、迁移和侵袭

摘要

为探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)排斥性引导分子骨形态发生蛋白辅助受体b反义RNA 1 (repulsive guide molecule bone morphogenetic protein coreceptor b antisense RNA 1, RGMB-AS1)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制,选取20例活动期和缓解期RA患者滑膜组织及20例正常滑膜组织,用qRT-PCR检测lncRNA RGMB-AS1和miR-129-5p的表达水平;分离培养RA滑膜成纤维细胞,将其分为si-NC组、si-RGMB-AS1组、pcDNA组、pcDNA-RGMB-AS1组、miR-NC组、miR-129-5p组、si-RGMB-AS1+anti-miR-NC组、si-RGMB-AS1+anti-miR-129-5p组;用MTT试验检测细胞活性;Transwell试验检测细胞迁移和侵袭;Western blotting检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-2、MMP-9、MMP-3、MMP-13蛋白表达;荧光素酶报告基因试验检测lncRNA RGMB-AS1和miR-129-5p的靶向关系。结果显示,与正常滑膜组织比较,缓解期和活动期RA患者滑膜组织中lncRNARGMB-AS1表达水平升高,miR-129-5p表达水平降低(P<0.05);与缓解期RA患者滑膜组织比较,活动期RA患者滑膜组织中lncRNA RGMB-AS1表达水平升高,miR-129-5p表达水平降低(P<0.05)。干扰lncRNA RGMB-AS1表达或过表达miR-129-5p后,RA滑膜成纤维细胞活性降低,迁移、侵袭细胞数减少,Cyclin D1、MMP-2、MMP-9、MMP-3、MMP-13表达水平降低,p21表达水平升高(P<0.05)。lncRNA RGMB-AS1靶向调控miR-129-5p,抑制miR-129-5p表达逆转了干扰lncRNA RGMB-AS1表达对RA滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的作用。该研究提示,干扰lncRNA RGMB-AS1表达可能通过上调miR-129-5p抑制RA滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭。