NOX4在幽门螺旋杆菌诱导胃癌细胞ROS中的作用

摘要

目的研究NOX4在幽门螺旋杆菌(H.pylori)诱导胃癌细胞氧化应激中的作用。方法将胃癌细胞株MKN-45分别与幽门螺旋杆菌菌株NCTC 26695、NCTC 11637共培养6 h,实验设未感染组与幽门螺旋杆菌感染组;用25 mmol/L的活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理MKN-45细胞30 min,实验设NAC未处理组与NAC处理组。用Western blotting检测细胞内还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)蛋白表达水平;采用活性氧检测试剂盒检测细胞内活性氧(ROS)水平,荧光显微镜观察幽门螺旋杆菌感染后ROS水平的变化,荧光酶标仪检测荧光强度。结果与未感染组相比较,幽门螺旋杆菌感染组细胞内ROS生成增多;感染NCTC 26695后NOX4蛋白的表达增加(t=11.67,P<0.001),感染NCTC 11637后,NOX4蛋白的表达增加(t=17.29,P<0.001);无论是NCTC 26695还是NCTC 11637菌株,NOX4蛋白表达上调的差异均有统计学意义(P<0.05)。NAC预处理后再用幽门螺旋杆菌感染,细胞中NOX4的表达显著降低[NCTC 26695(P<0.001);NCTC 11637(P<0.001)]。结论NOX4/ROS途径可能参与幽门螺旋杆菌对胃癌细胞氧化还原信号的激活。