苹果抗寒矮化砧MdAP2D67.1基因的克隆和低温响应表达分析

摘要

AP2/ERF是植物特有的转录因子,在各种胁迫响应中发挥至关重要的调控作用。本研究在前期苹果抗寒矮化砧木‘71-3-150’转录组中分离出1个AP2/ERF基因,克隆其cDNA全长并进行序列分析。结果表明,该基因编码蛋白含有AP2家族DNA结合结构域,与拟南芥AT2G28550同源,且与‘富士’苹果MdAP2D67相似性最高,将其命名为MdAP2D67.1(GenBank登录号:MT976146)。该基因开放阅读框长度1392 bp,编码463个氨基酸。MdAP2D67.1蛋白分子量为50.87 kD,等电点为6.74,该蛋白序列不含有信号肽和转运肽,不存在跨膜结构域,初步预测定位于细胞核中。利用实时荧光定量PCR技术分析表明MdAP2D67.1可被低温诱导表达,在‘71-3-150’韧皮部、叶芽、花芽中的表达量均高于抗寒性较弱的‘M_(9)T_(337)’,表明该基因与苹果矮化砧抗寒性密切相关。