全真一气汤对肾气虚型哮喘大鼠转录因子FOXP3/RORγt及Th17/Treg免疫失衡的影响

摘要

目的 观察全真一气汤对肾气虚型哮喘大鼠Th17/Treg及相关细胞因子（IL-6、IL-17、IL-10、IL-35）和转录因子维甲酸相关孤独核受体-γt（OrPhan nuclear recePtor gamma t, RORγt）、叉头状转录因子（forkhead transcriPtion factor P3,FOXP3）的影响，探讨全真一气汤调控哮喘气道炎症的机制。方法 将24只SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、全真一气汤低剂量治疗组(8.33g·kg-1)和全真一气汤高剂量治疗组(33.32 g·kg-1),每组6只。模型组与低、高剂量治疗组予卵蛋白1mg、氢氧化铝凝胶10 mg的混悬液1 mL致敏，1%的卵清蛋白超声雾化吸入以激发哮喘，进行惊恐刺激，负重游泳直至力竭等进行肾气虚型哮喘大鼠造模，造模成功后开始药物干预。空白组和模型组予生理盐水3 mL灌服，治疗组按低、高剂量予全真一气汤3 mL灌服，每日1次，连服30 d。实时荧光定量聚合酶链式反应（Real time Quanti tative PCR,qRT-PCR）检测各组大鼠肺组织中FOXP3、RORγt mRNA水平，流式细胞术检测外周血Th17、Treg细胞百分比，酶联免疫吸附实验（Enzyme Linked Immunosorbent Assay, ELISA）检测血清IL-6、IL-17、IL-10、IL-35细胞因子含量。结果 与空白组相比，模型组血Th17细胞比例、血清IL-6、IL-17含量及相关肺组织中RORγt mRNA和蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）,模型组Treg细胞比例、血清IL-10、IL-35含量及相关肺组织中FOXP3 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）;与模型组相比，全真一气汤低、高剂量组血Th17细胞百分比、血清IL-6、IL-17含量及肺组织RORγt mRNA和蛋白的表达明显减少（P＜0.05）,高剂量组血Treg细胞百分比显著升高（P＜0.05）,但全真一气汤低剂量组血Treg细胞百分比无显著变化（P＞0.05）,高剂量组血清IL-10含量增加（P＜0.05）,全真一气汤低剂量组IL-10含量亦增加，但差异无统计学意义（P＞0.05）,两组血清IL-35含量、FOXP3 mRNA及蛋白的表达同时明显升高（P＜0.05）;与全真一气汤低剂量组相比，高剂量组Th17细胞百分比明显降低（P＞0.05）,IL-17亦降低（P＞0.05）,IL-6含量及RORγt表达减少（P＜0.05）,高剂量组IL-35含量及Treg相关的FOXP3表达增加（P＜0.05）。结论 全真一气汤低剂量组、全真一气汤高剂量组全真一气汤均可降低Th17细胞及相关促炎因子IL-6、IL-17的含量，抑制RORγt的表达；高剂量组可以升高Treg细胞百分比，而全真一气汤低剂量组对Treg细胞百分比影响则不明显，但都可以上调FOXP3的表达，促进相关抑炎因子IL-10、IL-35分泌。