纤溶酶原激活物抑制因子－1突变体E350G，E351K的构建及性质研究

摘要

利用ＰＣＲ扩增和合成突变引物的方法，将ＰＡＬ－１的Ｇｌｕ３５０和Ｇｌｕ３５１分别突变为Ｇｌｙ和Ｌｙｓ，在大肠杆菌中表达并分离纯化突变体ＰＡＬ－１（Ｅ３５０Ｇ，Ｅ３５１Ｋ），用盐酸胍激活并以ＥＬＩＳＡ法确定它与野生型ｒＰＡＩ－１的相对含量。通过对ｕ－ＰＡ，ｔ－ＰＡ抑制的动力学研究表明，突变体与野生型ｒＰＡＩ－１相比，对ｕ－ＰＡ和ｔ－ＰＡ的抑制活性都有明显下降，由活性态向潜伏态转变的半寿期也由０．８３ｈ缩短为０．５７ｈ。