人免疫缺陷病毒1型TAT蛋白点突变对其反式激活作用的影响

摘要

不同免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－１，ＨＩＶ－２和ＳＩＶ）的Ｔａｔ均有３个高度保守的结构域：Ｃｙｓ富集域、核心域和碱性氨基酸富集域，用ＰＣＲ定点突变法在ＨＩＶ－１Ｔａｔ蛋白的这些区域引入单氨基酸或多氨基酸突变；构建了以ＨＩＶ－１ＬＴＲ－１５８到＋８Ｏ区域为启动子，含有不同突变点的突变Ｔａｔ基因表达质粒；以荧光酶基因为报告基因，瞬时共转染Ｊｕｒｋａｔ细胞：分析不同氨基酸突变对Ｔａｔ的反式激活作用的影响。结果发现，突变后的Ｔａｔ蛋白的活性均极大地降低或丧失，表明这些序列内的氨基酸的确定性对Ｔａｔ的活性至关重要。