RNA干扰靶向沉默诱骗受体3基因增加人胰腺癌细胞的放射敏感性

摘要

目的:探讨RNA干扰沉默诱骗受体3（decoy receptor 3,DcR3）基因对胰腺癌细胞放射敏感性的影响及其相关机制。方法:构建带有DcR3 siRNA序列的稳定表达质粒,通过脂质体转染至胰腺癌AsPC-1细胞株,设对照组、siRNA（-）阴性对照组和DcR3 siRNA组,应用Western blotting检测AsPC-1细胞中DcR3表达的变化,平板克隆形成实验检测转染DcR3 siRNA后AsPC-1细胞放射敏感性的变化,流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR和Western blotting检测Caspase-8、Caspase-3和PARP-1表达的变化。结果:DcR3 siRNA组细胞中DcR3蛋白表达水平较对照或siRNA（-）组明显降低（均P＜0.01）;DcR3 siRNA组的克隆形成率明显低于对照或siRNA（-）组,其存活分数（survival fraction,SF）降低、α/β比值升高（均P＜0.01）;放射后DcR3 siRNA组肿瘤细胞凋亡率明显高于对照或siRNA（-）组（均P＜0.01）;转染DcR3 siRNA后可以明显上调Caspase-8、Caspase-3的表达和下调PARP-1的表达。结论:RNA干扰沉默DcR3基因通过激活凋亡因子Caspase-8和Caspase-3促进细胞凋亡,从而增加胰腺癌细胞对放射的敏感性。