建立核酸序列依赖性扩增方法检测寨卡病毒

摘要

目的建立检测寨卡病毒的核酸序列依赖性扩增（NASBA）方法,满足口岸需要。方法根据寨卡病毒NS3基因设计并验证特异性扩增引物,建立NASBA方法。用登革病毒、基孔肯雅病毒、乙脑病毒、黄热病毒作为对照验证方法的特异性;用不同浓度寨卡病毒RNA进行NASBA扩增,确定方法的灵敏度。结果以寨卡病毒RNA为模板扩增获得NS3基因片段,序列分析未发现非特异性扩增。建立的NASBA方法只有寨卡病毒出现目的扩增条带,与对照病毒无交叉反应,最低检测限为1.2 pg/μl。结论建立的NASBA方法可以特异、准确地检测寨卡病毒RNA,可用于口岸寨卡病毒监测。