沉默单核细胞趋化蛋白3对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、迁移及凋亡的影响

摘要

目的：探讨沉默单核细胞趋化蛋白3（MCP-3）对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、迁移及凋亡等功能的影响。方法：取增生性瘢痕组织和正常皮肤组织，qRT-PCR检测正常皮肤组织和增生性瘢痕组织中MCP-3 mRNA表达水平；分离培养增生性瘢痕组织成纤维细胞（HSF）和正常皮肤组织成纤维细胞（NSF）,qRT-PCR和Western blot检测两种成纤维细胞中MCP-3 mRNA和蛋白表达水平。采用MCP-3干扰慢病毒（shRNA-MCP-3）和其阴性对照病毒（shRNA-NC）感染HSF,MTT检测各组细胞增值活性，流式细胞术检测各组细胞凋亡情况，Transwell实验检测细胞的迁移能力，qRT-PCR检测各组细胞中MCP-3、collagenⅠ和collagenⅢ mRNA水平，Western blot检测细胞中凋亡相关蛋白MCP-3、Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase-3及collagenⅠ和collagenⅢ蛋白表达水平。结果：MCP-3在增生性瘢痕组织及HSF中高表达。与blank组和shRNA-NC组比较，shRNA-MCP-3组细胞中MCP-3 mRNA和蛋白表达水平显著下降（P＜0.01），细胞增殖活性、迁移能力及细胞中collagenⅠ、collagenⅢ和Bcl-2表达水平均显著降低（P＜0.01），同时细胞凋亡率及凋亡蛋白Bax和Cleaved-caspase-3表达水平显著上升（P＜0.01）。结论：干扰MCP-3表达可能通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡，减少细胞合成胶原，从而发挥抑制瘢痕形成与发展的作用。