失血复合缺氧缺水缺食诱导心肌细胞凋亡及相关机制研究

摘要

目的定量研究失血复合缺氧缺水缺食情况下心肌细胞的凋亡及其机制。方法二级WISTAR大鼠160只,随机分为正常对照、单纯失血、缺氧缺水缺食、失血复合缺氧缺水缺食4组,每组40只,其中失血模型为剪尾法制备,失血量30%;缺氧组为将动物置于常压低氧舱内,氧浓度10%。所有动物于造模后1 d、3 d、5 d、7 d活杀取材,各时间点每组均为10只,雌雄各半;采用TUNEL(原位末端标记法)法检测心肌细胞凋亡,免疫组化SP法检查心肌组织中凋亡相关因子Bax、Bcl-2、caspase-3及核转录因子CREB的表达并进行积分光密度(IOD)和平均光密度(MOD)定量检测。结果单纯失血组、缺氧缺水缺食(三缺)组和失血并三缺组心肌细胞凋亡指数于入低氧舱1 d、3 d、5 d、7 d均显著高于正常对照组(P<0.01),其中失血并三缺组于早期较其他两组尤为明显(P<0.01);各时间点Bax和caspase-3表达均呈增强、MOD值增高趋势,其中早期失血并三缺组较失血组和三缺组更为明显(P<0.05);Bcl-2均呈表达减弱、MOD值降低趋势,尤其5 d～7 d时较明显(P<0.01);CREB于3 d、7 d呈现不同程度的表达增强(P<0.05),上述凋亡相关因子表达变化呈现失血并三缺组依次较三缺组、单纯失血组加重趋势。结论失血或三缺均导致大鼠心肌细胞凋亡指数增加,失血复合三缺可明显加重其上述变化;凋亡相关因子Bax、Bcl-2、caspase-3和CREB均参与其损伤过程。