采用免疫磁珠富集呋喃唑酮残留标示物的研究

摘要

将呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-恶唑烷酮（AOZ）单克隆抗体偶联至经3-乙基碳二亚胺（EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活化的磁珠上制备成免疫磁珠,建立快速、特异性富集鸡肉中残留标示物NPAOZ（3-[[（4-硝基苯基）-亚甲基]-氨基]-2-恶唑烷酮）的方法。纳米磁珠经EDC和NHS活化后与AOZ单克隆抗体偶联,得到抗体偶联量为50μg/mg的免疫磁珠。该免疫磁珠只对NPAOZ具有较高的特异性吸附,而对呋喃妥因代谢物AHD、呋喃西林代谢物SEM、呋喃它酮代谢物AMOZ的衍生物均无吸附作用。在样品前处理过程中利用免疫磁珠富集呋喃唑酮代谢物,当加标量为0.25~2 ng/g时回收率均在78%以上,变异系数为5.3%~10.9%,最低检测限为0.049μg/kg,远低于样品常规样品前处理法的最低检测限0.139μg/kg。结果显示基于免疫磁珠的样品前处理方法能有效富集鸡肉中NPAOZ,进一步有效提高ELISA检测方法的灵敏度。