苜蓿次生胚遗传转化系统优化

摘要

稳定高效的遗传转化系统是对苜蓿进行基因改良的重要前提条件。本实验以吉林省适产苜蓿品种为实验材料,对农杆菌介导的次生胚遗传转化系统中的各种关键影响因素进行了优化:胚性愈伤诱导培养基中2,4-D和KT的最适浓度分别为2 mg/L和0.5 mg/L;体胚分化培养基中6-BA和NAA的最适浓度均为0.5 mg/L;该法最适受体基因型为公农系列苜蓿品种;遗传转化过程中,胚性愈伤诱导培养基及体胚分化培养基中添加的卡那霉素浓度分别为75 mg/L和50 mg/L。通过GUS基因表达检测和定量RT-PCR分析表明,外源基因已经顺利整合进苜蓿基因组染色体中,遗传转化效率为20%左右。本实验为培育吉林省转基因苜蓿新品种工作提供了科学依据。