Dctn1在小鼠睾丸和精子中的定位及在变形过程中的功能初探

摘要

目的:探讨动力蛋白激活蛋白1(Dctn1)在小鼠精子变形过程中的作用。方法:通过Western印迹及间接免疫荧光技术分析Dctn1在小鼠睾丸及精子中的表达和定位。分别运用体外GC2-spd细胞系以及在体两种策略筛选出具有最高干扰效率的Dctn1的小干扰RNA(siRNA),进而应用睾丸网微注射技术,将混有示踪剂(0.4%台盼蓝)的Dctn1 siRNA注射至3周ICR小鼠的生精小管内,对照侧的睾丸注射阴性对照siRNA,正常组为不加任何处理的3周ICR小鼠。在注射后第3周取附睾尾部精子进行形态学分析。结果:Dctn1主要定位于精子的尾部。干涉后Dctn1 siRNA组的精子尾部畸形率为(23.57±0.55)%,明显高于对照组[(12.35±2.29)%,P<0.01,n=3],而正常组精子尾部畸形率为(3.37±0.69)%。结论:Dctn1在精子变形中可能发挥重要作用,它主要影响精子尾部的形成。