中毒患者血液中褪黑素浓度的气相色谱-串联质谱联用检测

摘要

目的建立血液中褪黑素的气相色谱-串联质谱联用(GC-MS-MS)检测方法,为临床中毒患者的救治提供依据。方法乙酸乙酯液-液提取血液中的褪黑素,进样1μl,色谱柱:BR-5MS,载气为氦气,流速为1.0 ml/min;柱温起始温度60℃,保持2 min,以速率20℃/min升至280℃,保持10 min,EI离子源。通过Full Scan确定保留时间(RT)、多反应监测模式(MRM)采集数据,进行定性定量检测。结果褪黑素色谱峰保留时间为13.998 min,以基峰m/z 173为母离子进行MS-MS分析,最终确定子离子m/z 129.7的最佳CID为18 eV,子离子m/z 158.5的最佳CID为15 eV。配制系列褪黑素浓度(x)和峰面积(y)进行线形回归,得标准曲线y=230.44x-9535.2,r=0.9984。选择信噪比(S/N)3∶1定性、S/N 10∶1定量,得到褪黑素定性检出限为1.0 ng/ml,定量检出限为3.5 ng/ml;日内精密度RSD为2.9%,日间精密度RSD为5.3%。结论与GC-MS相比,GC-MS-MS方法选择性好、灵敏度高、排除干扰强。