高盐低pH法提取尾叶桉叶绿体DNA方法建立及质量分析

摘要

以尾叶桉叶片为材料,用高盐低pH法纯化叶绿体,再用SDS法提取叶绿体DNA(cpDNA)。经琼脂糖电泳检测,纯化回收离心力为200 g、300 g、400 g、500 g得到的cpDNA条带较亮、无降解拖尾。以400 g提取的cpDNA为模板,用核基因组及叶绿体基因组特异引物做PCR,能扩增到叶绿体基因片段且没有扩增到核基因片段。以来自尾叶桉白色愈伤组织的核DNA作对照,能扩增到核基因片段且没有扩增到叶绿体基因片段。结果表明:高盐低pH法提取的尾叶桉cpDNA纯度高,没有核基因污染,适用于基因扩增。本研究操作简便,成本低,能为木本植物cpDNA的提取提供参考。