基于氧化及Caspase-3凋亡探讨益肾种子方防治大鼠睾丸损伤机制研究

摘要

目的探讨益肾种子方通过抗氧化及其诱导的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3凋亡途径防治奥硝唑所致的大鼠睾丸损伤的作用机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为5组,空白组、模型组、益肾种子方低、中、高剂量组,每组6只。除空白组外,均采用奥硝唑800 mg/(kg·d)灌胃制造睾丸损伤模型。中药组在造模的同时,分别予益肾种子方低、中、高剂量灌胃[3.37、6.93、13.86 g/(kg·d),每天1次],连续灌胃28天。干预后取材HE染色观察睾丸及附睾结构变化、测量睾丸组织中活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)含量;免疫组织化学染色分析睾丸组织Caspase-3表达。结果与空白组比较,模型组睾丸组织生精细胞不同程度损伤、减少,附睾组织有不同程度破坏和精子的减少,睾丸组织中ROS、MDA含量升高,SOD、CAT含量降低(P<0.01),免疫组化显示Caspase-3表达增多。与模型组比较,益肾种子方干预后睾丸生精细胞完整性有所恢复,Caspase-3明显减少;益肾种子方中剂量组ROS、MDA含量降低(P<0.05);益肾种子方高剂量组ROS、MDA含量降低(P<0.01),SOD、CAT含量增加(P<0.01,P<0.05)。结论益肾种子方可改善奥硝唑所致大鼠的睾丸及附睾损伤,其机制可能与调控氧化应激系统中ROS、MDA、SOD、CAT等含量,以及氧化应激诱导的Caspase-3凋亡途径有关。