镉对MCF-10A人乳腺细胞基因组DNA甲基化及miRNA表达的影响

摘要

目的研究镉对MCF-10A(Michigan Cancer Foundation-10 A)人乳腺细胞miRNA-155和miRNA-200c表达及基因组DNA总体甲基化水平的影响。方法取对数生长期MCF-10A细胞,设对照组;氯化镉单独染毒组(浓度分别为2.5、5.0、10.0和20.0μmol/L,分别染毒24 h)。流式细胞术检测细胞凋亡和周期情况,实时荧光定量PCR检测miRNA-155和miRNA-200c的表达水平,细胞免疫荧光法检测基因组DNA总体甲基化水平改变情况。结果与对照组比较,氯化镉在2.5、5.0、10.0和20.0μmol/L剂量条件下,细胞凋亡率上升(P<0.05),氯化镉在2.5μmol/L剂量条件下,可引起MCF-10A细胞miRNA-155表达下降(P<0.05),而在5.0和10.0μmol/L剂量条件下,miRNA-155表达则升高(P<0.05);氯化镉在5.0、10.0和20.0μmol/L剂量条件下,可引起MCF-10A细胞miRNA-200c表达下降;氯化镉在2.5、5.0、10.0和20.0μmol/L剂量条件下,MCF-10A细胞均呈现DNA组低甲基化(P<0.05),上述差异均有统计学意义。结论镉能促进MCF-10A细胞增殖凋亡,而DNA组低甲基化及miRNA表达的改变可能是镉致乳腺癌的早期的重要分子改变之一,具体机制仍有待进一步研究。