鱼源无乳链球菌透明质酸酶的表达及抗原性分析

摘要

透明质酸酶(HylB)是无乳链球菌重要的毒力因子。根据本实验室分离并公布在GenBank上的罗非鱼源无乳链球菌GD201008-001全基因组序列,PCR扩增获得长为2 346 bp,覆盖hylB保守功能区的基因片段。将该片段采用限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ消化后亚克隆至表达载体pET28a(+),经双酶切、测序鉴定后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,进行体外原核表达,获得88.5 ku的目的蛋白。将纯化后的目的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,经ELISA和Western blot鉴定该蛋白具有良好的免疫原性。